Изменение отдельных характеристик внеклеточной ДНК при патологических процессах, обусловленных воспалением, у пациентов с бронхиальной астмой и ревматоидным артритом

Обоснование. Поиск дополнительных диагностических маркёров, отражающих динамику развития исследуемых заболеваний, всегда является необходимой и актуальной задачей. Воспалительный процесс, как существенная часть патогенеза многих заболеваний, выступает одним из основных факторов, увеличивающих уровень внеклеточной ДНК (вкДНК) в плазме крови больных.

Цель исследования — определение индекса фрагментации вкДНК, количественного содержания митохондриальной ДНК (мвкДНК) в общем пуле вкДНК и уровня вкДНК, связанной с мембранами клеток крови, в крови пациентов с ревматоидным артритом и бронхиальной астмой для оценки перспективы диагностического применения этих характеристик в определении активности воспалительных процессов и эффективности терапевтических мероприятий.

Методы. Уровень общего пула вкДНК определяли с использованием флюоресцентного реагента Quant-ITTM PicoGreen для двухцепочечной ДНК. Количество мвкДНК и соотношение длинных и коротких фрагментов вкДНК плазмы крови были измерены с помощью количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени.

Результаты. Показано, что индекс фрагментации вкДНК был резко снижен относительно группы доноров (Ме=0,81) у пациентов как с бронхиальной астмой (Ме=0,42; р <0,001), так и с ревматоидным артритом (Ме=0,34; р <0,001). Проведённый курс терапии не оказывал существенного влияния на величину индекса фрагментации, оставаясь практически таким же, каким был при поступлении в клинику: в группе с бронхиальной астмой Ме=0,49, а в группе с ревматоидным артритом Ме=0,35. В группе пациентов с бронхиальной астмой нами была обнаружена умеренная корреляция мвкДНК с С-реактивным белком (ρ=0,34; p >0,05), а у пациентов с ревматоидным артритом близкие по величине связи с DAS-28 (ρ=0,36; p >0,05) и С-реактивным белком (ρ=0,28; p >0,05). Уровень мембраносвязанной фракции вкДНК заметно снижен у пациентов с ревматоидным артритом по сравнению со здоровыми донорами (18,7 нг/мл vs 55,6 нг/мл; p <0,01). У пациентов с бронхиальной астмой наблюдалось снижение величины мембраносвязанной фракции вкДНК по сравнению с группой доноров (19,4 нг/мл; p <0,01).

Заключение. Индекс фрагментации вкДНК и уровень мвкДНК не могут служить показателями, отражающими уровень воспалительной активности и, следовательно, величину патологического сдвига Th1/Th2-соотношения, при различных расстройствах деятельности иммунной системы. В пользу этого свидетельствует тот факт, что такие различные по уровню воспалительной активности заболевания, как ревматоидный артрит и бронхиальная астма, приводят к аналогичному снижению индекса фрагментации вкДНК относительно показателей здоровых доноров и не приводят к сколько-нибудь заметному отличию между средними уровнями мвкДНК в плазме этих пациентов.