Aim: to evaluate the secretory activity of mononuclear blood leukocytes by the level of in vitro production of oppositional cytokines (pro-inflammatory IL-6 and anti-inflammatory IL-10) in rats in a model of diet-induced metabolic syndrome (MS) against the background of changes in the concentration of adipokines leptin and adiponectin.
Materials and methods. In male Wistar rats, MS was modeled by keeping for 12 weeks on a high-fat and high-carbohydrate diet; control group animals received a normal diet. Mononuclear leukocytes isolated by gradient centrifugation from heparinized blood were cultured in a medium based on RPMI-1640 (concentration of 2×106 cells in 1 ml of medium) for 24 hours in sterile tubes in a CO2-incubator in two variants – without the addition of an inducer and with the addition of bacterial lipopolysaccharide (LPS). The concentration of cytokines in the culture fluid, hormones leptin and adiponectin in the blood serum was determined by enzyme immunoassay. Statistical data processing was carried out in the SPSS Statistics 23.
Results. In animals exposed to a 12-week high-fat and high-carbohydrate diet, against the background of an increase in body weight, the specific mass of visceral adipose tissue, metabolic disorders (hyperglycemia, impaired glucose tolerance, dyslipidemia), high concentrations of leptin and low concentrations of adiponectin, the ability of mononuclear blood leukocytes to produce IL-6 and IL-10 in vitro at the basal level and when stimulated by bacterial LPS does not change.
Conclusion. Probably, the morphofunctional status and secretory profile of monocyte-macrophage system cells depends on the severity and duration of the metabolic and hormonal imbalance associated with obesity and systemic chronic inflammation.
Целью исследования являлась оценка секреторной активности мононуклеарных лейкоцитов крови по уровню продукции in vitro оппозитных цитокинов (провоспалительного IL-6 и противовоспалительного IL-10) у крыс в модели диет-индуцированного метаболического синдрома (МС) на фоне изменения концентрации адипокинов лептина и адипонектина.
Материалы и методы. У крыс-самцов линии Вистар моделировали МС посредством содержания в течение 12 недель на высокожировой и высокоуглеводной диете; животные контрольной группы получали обычный рацион. Выделенные методом градиентного центрифугирования из цельной гепаринизированной крови мононуклеарные лейкоциты культивировали в полной питательной среде на основе RPMI-1640 (концентрация 2×106 клеток в 1 мл среды) в течение 24 ч. в круглодонных стерильных пробирках в СО2- инкубаторе в двух вариантах – без добавления индуктора и с добавлением бактериального липополисахарида (ЛПС). Концентрацию цитокинов в культуральной жидкости, гормонов лептина и адипонектина в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа. Статистическую обработку данных проводили в программе SPSS Statistics 23.
Результаты. У животных, подвергнутых воздействию 12-недельной высокожировой и высокоуглеводной диеты, на фоне увеличения массы тела, удельной массы висцеральной жировой ткани, метаболических нарушений (гипер- гликемия, нарушение толерантности к глюкозе, дислипидемия), высокой концентрации лептина и низкой концентрации адипонектина способность мононуклеарных лейкоцитов крови продуцировать in vitro IL-6 и IL-10 на базальном уровне и при стимуляции бактериальным ЛПС не изменяется.
Заключение. Вероятно, морфофункциональный статус и секреторный профиль клеток моноцитарно-макрофагальной системы зависит от степени выраженности и длительности метаболического и гормонального дисбаланса, ассоциированного с ожирением и системным хроническим воспалением.