Исследование термической денатурации молекулы плазминогена при индуцированном окислении

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Статья посвящена исследованию термической денатурации молекулы плазминогена при индуцированном окислении гипохлоритом в концентрациях 30, 62.5, 125 и 250 мкМ. Методом дифференциальной сканирующей калориметрии было определено, что в присутствии окислителя энтальпия денатурации молекулы плазминогена понижается. Наиболее заметно это проявляется для пика, показывающего плавление крингл-доменов К4–К٥. Эти результаты согласуются с полученными ранее данными по окислительной модификации аминокислотных остатков плазминогена, обработанного гипохлорита в разных концентрациях, с использованием метода тандемной масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС/МС). В совокупности полученные данные и результаты предыдущих исследований показывают, что структура полноразмерного плазминогена адаптирована к умеренному окислению, индуцированному HOCl.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Л. А. Вассерман

Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля Российской академии наук

Email: lyu.yurina@gmail.com
Россия, Москва

Е. С. Гаврилина

Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля Российской академии наук

Email: lyu.yurina@gmail.com
Россия, Москва

Л. В. Юрина

Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля Российской академии наук

Автор, ответственный за переписку.
Email: lyu.yurina@gmail.com
Россия, Москва

А. Д. Васильева

Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля Российской академии наук

Email: lyu.yurina@gmail.com
Россия, Москва

М. А. Розенфельд

Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля Российской академии наук

Email: lyu.yurina@gmail.com
Россия, Москва

Список литературы

  1. Miles L. // Trends in Cardiovascular Medicine. 2003. V. 13. № 1. P. 21; doi: 10.1016/S1050-1738(02)00190-1
  2. De Souza L.R., Melo P.M., Paschoalin T. et al. // Biochem. and Biophys. Res. Commun.. 2013. V. 433, № 3. P. 333. doi: 10.1016/j.bbrc.2013.03.001
  3. McKenna S.M., Davies K.J.A. // Biochem. J. 1988. V. 254. № 3. P. 685; doi: 10.1042/bj2540685
  4. Ulfig A., Leichert L.I. // Cell. Mol. Life Sci. 2021. V. 78. № 2. P. 385; doi: 10.1007/s00018-020-03591-y
  5. Vasilyeva A. Yurina L., Ivanov V. et al. // Intern. J. of Biolog. Macromol. 2022. V. 206. P. 64; doi::10.1016/j.ijbiomac.2022.02.128
  6. Deutsch D.G., Mertz E.T. // Science. 1970. V. 170. № 3962. P. 1095; doi: 10.1126/science.170.3962.1095
  7. Laemmli U.K. // Nature. 1970. V. 227. № 5259. P. 680; doi: 10.1038/227680a0
  8. White N.J., Wang Y., Fu X. et al. // Free Radical Biol. and Med. 2016. V. 96. P. 181; doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2016.04.023
  9. Васильева А.Д., Юрина Л.В., Азарова Д.Ю. и др. // Хим. физика. 2022. Т. 41. № 2. C. 51; doi: 10.31857/S0207401X220201455
  10. Юрина Л.В., Васильева А.Д., Евтушенко Е.Г. и др. // Хим. физика. 2024. V. 43. № 4. С. 81.
  11. Lau W.-H., White N.J., Yeo T.-W. et al. // Sci. Rep. 2021. V. 11. № 1. 15691; doi: 10.1038/s41598-021-94401-3
  12. Шайтан К.В. // Хим. физика. 2023. Т. 42. № 6. С. 40; doi: 10.31857/S0207401X23060109
  13. Васильева А.Д., Юрина Л.В., Щеголихин А.Н. и др. // Докл. АН. 2019. Т. 488. №5. С. 560; doi: 10.31857/S0869-56524885560-566
  14. Шишкина Л.Н., Козлов М.В., Константинова Т.В. и др. // Хим. физика. 2023. Т. 42. № 1. С. 28; doi: 10.31857/S0207401X23010107
  15. Castellino F.J., Ploplis V.A., Powell J.R., Strickland D.K. // J. Biol. Chem. 1981. V. 256. № 10. P. 4778.
  16. Novokhatny V.V., Kudinov S.A., Privalov P.L. // J. of Mol. Biol. 1984. V. 179. № 2. P. 215; doi: 10.1016/0022-2836(84)90466-2
  17. Freire E., Biltonen R.L. // Biopolymers. 1978. V. 17. № 2. P. 481; doi: 10.1002/bip.1978.360170213
  18. Розенфельд М.А., Юрина Л.В., Васильева А.Д. // Успехи соврем. биологии. 2021. Т. 141. № 4. C. 315; doi: 10.31857/S0042132421040050

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Электорофореграмма продуктов деградации фибриногена ΦГ, образованных под воздействием плазмина (5%-ный концентрирующий гель, 8%-ный разделяющий гель). Дорожка 1 – маркерные белки; 2 – негидролизованный фибриноген; 3 – гидролиз фибриногена плазмином, образованным из неокисленного плазминогена; продукты распада фибриногена, продуцируемые плазмином, образованные из: 4 – плазминогена, обработанного 30 мкМ HOCl/–OCl; 5 – плазминогена, обработанного 62.5 мкМ HOCl/–OCl; 6 – плазминогена, обработанного 125 мкМ HOCl/–OCl; 7 – плазминогена, обработанного 250 мкМ HOCl/–OCl.

Скачать (97KB)
Метаданные
3. Рис. 2. ДСК-Термограммы денатурации контрольного образца плазминогена (1) и образцов, обработанных гипохлоритом натрия в разных концентрациях: 62.5 мкМ (2), 125 мкМ (3), 250 мкМ (4), 50 мМ фосфатный буфер, рН 7.4, 150 мМ NaCl, концентрация плазминогена – 3 мг/мл; T1, T2, T3 – температуры денатурации переходов.

Скачать (26KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Деконволюция ДСК-термограмм денатурации контрольного образца плазминогена (а) и образцов, обработанных гипохлоритом натрия в разных концентрациях: 62.5 мкМ (б), 125 мкМ (в); 250 мкМ (г) на 1 мг белка; 50 мМ фосфатный буфер, рН 7.4, 150 мМ NaCl, концентрация плазминогена – 3 мг/мл. Сплошные линии – экспериментальная ДСК-термограмма, штриховые – результат деконволюции ДСК-термограмм, где Т1, Т2 и Т3 соответствуют температурным переходам.

Скачать (73KB)
Метаданные

© Российская академия наук, 2024